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人免疫缺陷病毒型通用PCR检测试剂盒说明书

更新时间:2020-04-27

简要描述:

上海研尊生物科技有限公司专业提供人免疫缺陷病毒型通用PCR检测试剂盒说明书质量卓越和良好的服务态度,竭诚为您服务(本产品质量保证)!

运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。

产品名称

人免疫缺陷病毒型通用PCR检测试剂盒说明书

英文名称

Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1)IRTPCR

货号

YZP3750

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

以下是人免疫缺陷病毒型通用PCR检测试剂盒说明书的相关产品:

好食脉孢菌

李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2) 规格: 250g 用途: 用于李斯特氏菌的选择性增菌培养(GB 4789.30-2010)。

去氢胆酸钠/脱氢胆酸钠/3,7,12-三氧-5β-胆烷酸钠/Sodium dehydrocholateBR,95%100克国产/进口

人结肠细胞英文名称:HT-29

人肝实质细胞完全培养基100mL

脑心浸液/无琼脂脑心浸液/脑心浸液肉汤/BHI用于金黄色葡萄球菌的培养250克国产/进口

炭黑曲霉 Aspergillus carbonariusPA319(人大肠细胞)

大鼠肝动脉平滑肌细胞完全培养基100mL

去氢胆酸/脱氢胆酸/3,7,12-三氧-5β-胆烷酸/Dehydrocholic acidBR,98.5%10/100/500克国产/进口

HA(人羊膜细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠畸胎瘤细胞酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人免疫缺陷病毒型通用PCR检测试剂盒说明书七叶皂苷D CAS 219944-46-4 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

甲泼龙 CAS  规格: 100mg 订购|咨询

3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ CAS 68027-14-5 规格: HPLC≥98%;5mg/支 订购|咨询

乙素 CAS 50906-56-4 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

绞股蓝皂苷XLIX;Gypeside CAS 94987-08-3 规格: 20mg 订购|咨询

菝葜 CAS  规格: 2g 订购|咨询

苍耳亭 CAS 26791-73-1 规格: HPLC≥98%,5mg/支 订购|咨询

千年健对照药材 CAS  规格: 1g 订购|咨询

头孢唑 CAS 26973-24-0 规格: 100mg 订购|咨询

白皮杉醇;Piceatanl CAS 10083-24-6 规格: 20mg 订购|咨询

京平苷酸;Geniposidic ac CAS 27741-01-1 规格: 20mg 订购|咨询

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

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