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新生牛血清-血清化冻三步法
发布时间:2020-06-17   点击次数:109次
   新生牛血清是通过对出生12-24小时新生牛进行静脉采血而得到的血清。新生牛血清中营养丰富,蛋白含量和各种生长因子都较高,价格较胎牛血清低得多,是目前动物细胞培养中zui常用的血清。

新生牛血清

  动物血清是一种富含营养的细胞培养基,它含有重要的蛋白质、脂类小分子、盐、维生素、微量元素、氨基酸和其他复杂的成分,它们都是细胞生长所必需的营养素。
  其中,胎牛血清和新生牛血清是zui常用的两种。新生牛血清尤其在生物工程(如病毒疫苗工程,重组生物药)行业中zui为常用。其中,在使用中应注意以下事项:
  血清常储存在-20℃,避光(因为光线可造成维生素的损失),避免反复冻融,尤其不要放在有自动除霜功能的冰箱中。如果一次用不完,应分装在15ml或50ml大离心管或其他小瓶中,一次使用一管,较为方便。
  在血清化冻时,应尽可能减少化冻的时间,因为在已化冻的液体中,可能出现盐浓度升高的现象,时间过长,会对血清活性因子存在一定影响。我们推荐血清化冻三步法。该三步法在许多实验室中行之有效,且化冻后对血清品质没有任何影响。以500ml血清为例。从冰箱取出时,先在室温放置90分钟,或水浴15-20℃解冻18分钟。再在20℃水浴中存放25分钟,再在37℃水浴中存放35分钟,这样血清即可完全融化。
  注意:这三步法应严格遵循,zui后一步温度不可高于37℃,时间也不可延长,否则可能造成蛋白沉淀。在水浴时,注意不要使瓶装血清在水浴箱中悬浮。同时,每隔10-15分钟应轻轻晃动一下瓶子,以使盐和蛋白均匀分布在液体中。
  血清在冻存时也应尽量迅速,避免让血清成分暴露在过高的盐浓度中,造成过多的结晶沉淀。
  血清在-20℃存放时通常能保存5年时间而不影响其品质。也有研究表明,血清在过了生产商规定的效期后,仍能促进细胞的zui佳生长。
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